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#27169 Endothelin-3 Assay Kit - IBL【受注生産品】

  • #27169 Endothelin-3 ELISA Kit
  • #27169 Endothelin-3 ELISA Kit
使用用途:
研究用試薬
測定方法:
ELISA
測定対象:
ヒト
対象検体:
EDTA-血漿, 血清, 組織抽出液, 培養上清
測定範囲:
0.78 ~ 50 pg/mL
容量1:
96 Well
価格1:
165,000円

※ 診断や医療目的に用いることはできません。
※ 掲載のデータシートは見本です。ご使用の際には物品同梱のデータシートをご確認ください。

製品概要

製品概要

製品コード 27169
製品名 Endothelin-3 Assay Kit - IBL【受注生産品】
メーカー名 株式会社免疫生物研究所
使用用途: 研究用試薬
測定方法 ELISA
標識 HRP
測定対象 ヒト
対象検体 EDTA-血漿, 血清, 組織抽出液, 培養上清
測定範囲 0.78 ~ 50 pg/mL
一次反応 2 ~ 8℃ Overnight
ニ次反応 2 ~ 8℃ 30分間
感度 0.36 pg/mL
特異性 測定物質 交差率
Endothelin-3 100.0%
Endothelin-1 7.50%
Endothelin-1 (1-31) ≦0.1%
Endothelin-2 (1-31) ≦0.1%
Human Big Endothelin-1 ≦0.1%
Rat Big Endothelin-1 0.60%
保管 2 ~ 8 ℃
毒物劇物 非該当
カルタヘナ 非該当
測定サービス なし
容量1 96 Well
価格1 165,000円

製品説明

製品説明

エンドセリン(ET)は当初、血管内皮細胞由来の全く新しい血管収縮ペプチドとして同定されました。ETには、異なる遺伝子によってコードされた 21アミノ酸から構成される薬理活性の異なる3つのアイソフォーム、ET-1, ET-2, ET-3が存在し、また血中ではその前駆体のBig ET-1, Big ET-2, Big ET-3を含めたET関連ペプチドが存在します。このETファミリーは血管内皮細胞に限局せず広範な組織で発現しており、一過性の血管拡張作用と、それに引き続く持続的な血管収縮作用を有します。エンドセリンの受容体は、ETAとETBの2種類が存在しこれらの組織に広く分布し、ETAは血管収縮作用、ETBは血管拡張作用に関与していると考えられています。このようにETが多彩な生理活性を示すことからETファミリーがパラクリンあるいはオートクリンとして局所ホルモンの機能を果たしていると考えられています。 ET-3の血管拡張作用はET-1およびET-2に比べ非常に弱いと言われています。

※ 抽出処理については、本製品データシートp2の「12. Endothelinの抽出および濃縮操作(IBL社規格)」をご参照ください。

抽出処理について、下記論文をご参考ください。
血漿
A sandwich-type enzyme immunoassay to detect immunoreactive big-endothelin-1 in plasma. N Suzuki et al. J Immunol Methods
. 1990 Mar 9;127(2):165-70.

A sensitive sandwich-enzyme immunoassay for human endothelin. N Suzuki et al. J Immunol Methods. 1989 Mar 31;118(2):245-50
血清
Serum endothelin-1 concentrations and cold provocation in primary Raynaud's phenomenon. M R Zamora et al. Clinical Trial Lancet. 1990 Nov 10;336(8724):1144-7.
顆粒球
Specific sandwich-type enzyme immunoassays for smooth muscle constricting novel 31-amino acid endothelins. N Okishima et al. Biochem Biophys Res Commun. 1999 Mar 5;256(1):1-5.

よくある質問FAQ

よくある質問FAQ

  • 質問
    Q.なぜ血液検体でのEndothelin-3 (ET-3)測定には、Sep-Packを使い抽出および濃縮操作が必要なのですか。
    操作をしなくても測定できますか。
  • 回答
    A.健常人の血液中ET-3の含有量は非常に低値(例:0.48pg/mL)のため、血中ET-3の測定は非常に難しいです。
    よって、Sep-Packでの抽出・濃縮操作はアッセイに必須です。操作なしにアッセイは成立しません。
    尚、抽出・濃縮後のET-3量は回収率により低値になります。よって、測定検体量を5~10mL準備できることが望ましいです。
    操作内容については、能書の2p 12. Endothelin の抽出および濃縮操作をご覧ください。
  • 質問
    Q.本キットに使用される抗体は、ET-3のどの部位を認識しますか。
  • 回答
    A.固相抗体 Anti-ET (15-21)はC末側を認識し、検知する側の抗体はN末側を特異的に認識します。
  • 質問
    Q.Endothelins の抽出方法について教えてください。
  • 回答
    A.本製品の能書にてご確認ください。また、該当製品ページの製品説明欄に参考論文を掲載しておりますので、そちらをご参照下さい。
    https://www.ibl-japan.co.jp/search/product/detail/id=3869
  • 質問
    Q.血液検体において、Endothelins の抽出は必須ですか。
  • 回答
    A.必須です。血清および血漿検体を測定する場合は、能書に従いSepPakなどのカラムによる抽出をしてから測定してください。
  • 質問
    Q.血液検体が0.5mLしかありません。測定可能ですか。
  • 回答
    A.可能ですが、血液中のエンドセリン濃度は低濃度ですので、抽出処理後でも濃度不足が懸念されます。予めご了承ください。
    推奨は2mL以上です。
  • 質問
    Q.キットの希釈用緩衝液の組成は同じですか。混ぜて使用しても良いですか。
    ELISA共通FAQ
  • 回答
    A.違います。Kitの部品は、基本そのKitで使用してください。また、混ぜて使用することはできません。
  • 質問
    Q.濃縮洗浄液の組成を教えてください。
    ELISA共通FAQ
  • 回答
    A.一般的なTweenとリン酸Buffer⇒0.05%Tween-20 in PB です。
  • 質問
    Q.使用プレートの特徴を教えてください。
    ELISA共通FAQ
  • 回答
    A.平底で分割可能なストリップタイプ (8ウェル x 12ストリップ)を使用してます。
  • 質問
    Q.溶解後の標準物質は再利用可能ですか。
    ELISA共通FAQ
  • 回答
    A.推奨しません。溶解後は速やかに使用してください。
    ※ただし、製品によっては溶解後の標準物質を凍結保存し、
    1回のみ再使用可能です。データシートをご確認下さい。
  • 質問
    Q.試薬ブランクと検体ブランクの違いは何ですか。
    ELISA共通FAQ
  • 回答
    A.試薬ブランクは、EIA緩衝液のみ添加します。洗浄不足や他の操作等で検体ブランクに異常が出ていないか確認するため設定してます。検体ブランクは、EIA緩衝液とHRP抗体を添加します。バックグラウンドの算出が目的です。
  • 質問
    Q.キットで何検体の測定が可能ですか。
    ELISA共通FAQ
  • 回答
    A.キットに同梱されている固相抗体は96 wells plateです。スタンダードで16 wells (2 slits) 使用し、80 wells (10 slits) を2重測定することを推奨します。よって最大40検体測定可能です。
  • 質問
    Q.LOD (limit of Detection)について教えてください。
    ELISA共通FAQ
  • 回答
    A.NCCSL法にて算出した感度です。能書をご参照ください。
  • 質問
    Q.LOQ (Limit of Quantification)について教えてください。
    ELISA共通FAQ
  • 回答
    A.スタンダード測定範囲の下限値がLOQです。能書をご参照ください。
  • 質問
    Q.反応時間Over Night (O/N)の定義について教えてください。
    ELISA共通FAQ
  • 回答
    A.各ELISA製品の能書上に特別記載がない限り、反応には16時間以上を要します。
  • 質問
    Q.ELISA製品リリースの品質規格について教えてください。
    ELISA共通FAQ
  • 回答
    A.品質規格については、各ELISA製品ロット毎のCoAに記載されておりますのでご照会ください。
  • 質問
    Q.プレートストリップの端に付番されている番号(例:432143214321)は何ですか。
    ELISA共通FAQ
  • 回答
    A.プレートメーカー(ThermoFisher)に確認したところ、金型の番号であり、番号の順番に特別な意味はありません。
  • 質問
    Q.ELISAプレートの洗浄方法を教えてください。
    ELISA共通FAQ
  • 回答
    A.自動洗浄機での洗浄を推奨します。
    洗浄瓶による洗浄の場合こちらの動画をご参照ください。
  • 質問
    Q.キットで試験中にウェルが黒くなってしまった。
    ELISA共通FAQ
  • 回答
    A.HRP標識抗体反応後の洗浄工程で洗浄不足だった可能性があります。
    必ず350μL以上の洗浄液でデータシートの記載回数の洗浄を行うようにしてください。